技術(shù)文章
Technical articles生物通報道自從顯微鏡被發(fā)現(xiàn)以來,科學(xué)家們一直致力于改進這一技術(shù)用于顯示更小的細胞結(jié)構(gòu)以深入了解人類細胞、細菌和病毒的內(nèi)部機制。如今來自國立衛(wèi)生研究員(NIH)下屬關(guān)節(jié)炎、肌肉骨骼肌皮膚疾病國家研究院(NIAMS)的研究人員開發(fā)了一種新技術(shù)可清楚觀察到病毒內(nèi)的結(jié)構(gòu)。他們在一期(1月13日)的《科學(xué)》(Science)雜志上報道了這一成果。生物通www.ebiotrade.com獲?。築io-RadChemiDocMP多色熒光成像系統(tǒng)資料低溫電子顯微鏡(cryo-EM)技術(shù)是一種...
摘要:生物通www.ebiotrade.com1月15日,來自澳大利亞墨爾本大學(xué)、華大基因等處的研究人員聯(lián)合在《自然遺傳學(xué)》(NatureGenetics)發(fā)表了題為“Whole-genomesequenceofSchistosomahaematobium”的研究論文,報告了對埃及血吸蟲(Schistosomahaematobium)全基因組測序的研究成果。索?。篗illipore抑制劑技術(shù)手冊生物通www.ebiotrade.com生物通報道1月15日,來自澳大利亞墨爾本大...
摘要:生物通www.ebiotrade.com在近日召開的植物和動物基因組大會上,孟山都基因組分析中心的研究人員ToddMichael介紹了他們?nèi)绾卫肐onPGM測序儀對玉米石(又名白花景天)這種植物的基因組進行測序。在干旱條件下,這種植物可從標準的C3光合作用轉(zhuǎn)換到景天酸代謝(CAM)。索?。篒onPGM測序資料生物通www.ebiotrade.com生物通報道在近日召開的植物和動物基因組大會上,孟山都基因組分析中心的研究人員ToddMichael介紹了他們?nèi)绾卫肐on...
過去用于檢測Tg自身抗體的方法有:沉淀試驗、間接免疫熒光(11F)、血凝試驗、ELISA和放射定量分析。目前常用IIF法和ELISA法。IIF法熒光圖形為在甲狀腺濾泡腔內(nèi)出現(xiàn)波浪狀著染。在甲狀腺炎患者中抗TPO抗體檢測方法的靈敏度稍遜于抗Tg抗體,但實際上兩者的檢出率不相上下。用高靈敏度方法檢測Tg,可能會降低與疾病相關(guān)的特異性。一些評估Tg自身抗體特異性的研究表明,甲狀腺功能正常的個體與自身免疫性甲狀腺炎免疫應(yīng)答之間存有一定的差別。正常人亦可產(chǎn)生能識別相同或具有交叉反應(yīng)性抗...
很多免疫學(xué)技術(shù)依賴于標記抗體的使用。對抗體進行標記主要是用于抗原的定位分析,在某些情況下,也可以對混雜有大量其他分子的樣本中的抗原進行定量檢測。由于抗體與其相應(yīng)抗原具有很高的親和力,因此帶有易識別標記物的抗體可以定位分析抗原,并且是一種理想的快速價廉的定量測定方法。需要使用標記抗體的三種方法,即免疫染色法、免疫印跡法和免疫分析。此三種方法均能定位復(fù)雜混合物中的抗原,而且通過適當?shù)膶φ找材芏繙y定。就免疫染色法而言,其目的就是定位正常細胞環(huán)境中出現(xiàn)的抗原。在此背景下,所有抗原均...
1.如果使用經(jīng)免疫沉淀法得到的蛋白,按常規(guī)洗滌免疫復(fù)合物。盡可能*去除zui后的洗液。如果使用其他來源的蛋白,則將其轉(zhuǎn)入20mmol/L的磷酸鹽溶液中(pH7.0),或直接在20/1l水中重懸蛋白。蛋白濃度應(yīng)低于lmg/m1。2.加入20u1.5%SDS和20mmol/LDTI。3.加熱至85C10min,仔細將上清液移入另一試管。4.加入10rd新鮮配制的0.2mmol/LN-乙基順了烯二酰亞胺(NEM),12.5mg/m1的水溶液為飽和溶液),使用前臨時配制。85℃溫育1...
所有的固定方案必須做到:①防止抗原丟失;②透化細胞以便使抗體進入;③盡量使抗原保持能與抗體結(jié)合的狀態(tài);④維持細胞正常結(jié)構(gòu)。常用的固定劑種類很多,固定劑的正確選擇取決于被研究抗原的性質(zhì)及所用抗體的特性。固定劑可分為兩大類:有機溶劑和交聯(lián)劑。有機溶劑如乙醇和丙酮能夠去除脂類物質(zhì)使細胞脫水,把蛋白質(zhì)沉淀在細胞結(jié)構(gòu)上。交聯(lián)劑一般通過自由氨基基團把生物分子橋連起來,形成一個相互連接的抗原網(wǎng)。兩種方法均使蛋白質(zhì)抗原部分變性。因此,在細胞染色中,能夠識別變性蛋白的抗體更加有用。在某些情況下...
1.主要內(nèi)容純化率為1000~10000倍??焖偌兓乖瑢游鲋?芍貜?fù)使用。可獲得純化的抗原。不能用于定量測定。純化效果取決于抗原的濃度和抗體的親和力需要適當純化的抗體。2.操作步驟(1)將抗體結(jié)合到蛋白A或蛋白G微珠上。對于一般用途的層析柱,每毫升濕的微珠大約可以結(jié)合2mg單克隆抗體或親和純化的多克隆抗體。將抗體和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的勻漿,在總量為10ml的溶液中加入大約lml微珠,室溫孵育1h,輕輕搖動混勻。(2)用10倍體積的0.2mol/L硼酸鈉(pH9...